Technische Leistung • Menschliche Werte
Durchflusszytometrie
Die Durchflusszytometrie ist eine Methode zur Messung zellulärer (partikulärer) Bestandteile aus einer Suspension mittels Detektion charakteristischer Lichtsignale; weitere Details siehe Immustatus.
1. Untersuchungsangebot, Probenvolumen/ Material, Probenlagerung/ Transport und Probenalter
| Untersuchung | Probenvolumen/ Material | Lagerung / Transport | Probenalter |
|---|---|---|---|
| Immunstatus/ Lymphozytendifferenzierung |
2,7 ml EDTA-Blut | 20º - 25º C | bis 24 h |
| CD20+ B-Lymphozyten (Therapiekontrolle) | 2,7 ml EDTA-Blut | 20º - 25º C | bis 24 h |
| CD 57+ NK-Zellen (chronische Borreliose) | 2,7 ml EDTA-Blut | 20° - 25° C | bis 24 h |
| Lymphom- (Leukämie-) Immunphänotypisierung | 2 x 2,7 ml EDTA-Blut | 20º - 25º C | bis 24 h |
Tabelle 1: Derzeit etablierte durchflusszytometrische Untersuchungsmethoden.
Bei Fragen zu Diagnostik/ Untersuchungsmethoden und Literatur steht Ihnen das Labor gerne zur Verfügung.
2. Lymphozytendifferenzierung (zellulärer Immunstatus)
Neben den aufgeführten Antigenen, über die die Hauptpopulationen der Lymphozyten nachgewiesen werden, kann das Untersuchungsspektrum um weitere relevante Marker erweitert werden, um u.a. eine Aussage über die Zellaktivierung oder den Grad der Ausdifferenzierung zu ermöglichen. Bei entsprechender Verdachtsdiagnose können die Ergebnisse Hinweise auf angeborene bzw. erworbene Immundefekte, auf infekt- und therapiebedingte Zustände sowie auf das Vorliegen von Leukämien bzw. Lymphomen geben.
| Lymphozyten-Subpopulation | Nachweis-Antigene | Referenzbereiche Zellen/µl | Referenzbereiche relativ (%) |
|---|---|---|---|
| B-Lymphozyten | CD19+ | 100 - 500 | 6 - 19 |
| Natürliche Killer (NK)-Zellen | CD3+CD16/56+ | 60 - 500 | 5 - 28 |
| T-Lymphozyten | CD3+ | 700 - 2100 | 57 - 85 |
| CD4+T-Zellen | CD3+CD4+ | 400 - 1400 | 29 - 59 |
| CD8+ (zytotoxische) T-Zellen | CD3+CD8+ | 200 - 900 | 10 - 39 |
| CD4/CD8 –Quotient | 1,0 - 3,7 (Ratio) | ||
| Aktvierte (HLA-DR+) T-Zellen | CD3+HLA-DR+ | 60 - 300 | 3 - 15 |
Tabelle 2: Referenzbereiche für die Zellzahlen bzw. Relativanteile verschiedener Lymphozytensubpopulationen bei Erwachsenen angepasst an das laborspezifische Aufarbeitungs-und Messprotokoll. Die Werte sind verfahrensabhängig, weshalb jeweils die mit dem Befund übermittelten Referenzbereiche gültig sind. Literatur auf Anfrage im Labor erhältlich.
Die Ergebnisse von Kinderproben werden anhand einer altersspezifischen Referenzbereichstabelle beurteilt.
| Analyt | Vorkommen und mögliche Ursachen einer Veränderung |
|---|---|
| CD3+ | Alle reifen T-Zellen im peripheren Blut. Eine Vermehrung tritt bei manchen Infektionen, Leukämien und Lymphomen auf. Verminderte Werte finden sich vor allem bei Immundefekten, bestimmten Infektionen, Radiatio und Medikation mit Steroiden, Zytostatika und Cyclosporin A. |
| CD3+CD4+ | T-Zell-Subpopulation mit hauptsächlich helfender Aktivität (Helferzellen). Das CD4-Molekül dieser Subpopulation dient als Membranrezeptor für HIV. Daher ist die absolute Anzahl CD4-positiver Zellen bei HIV Infizierten von besonderer Relevanz. Bei einer Zahl < 400/µl ist von einer Insuffizienz des zellulären Systems auszugehen. |
| CD3+CD8+ | T-Zell-Subpopulation, die überwiegend für zytotoxische Mechanismen verantwortlich ist. Bei manchen Virusinfektionen (z.B. infektiöse Mononukleose) können extrem hohe Zellzahlen auftreten. Verminderung u.a. bei manchen Autoimmunerkrankungen. |
| CD4/CD8-Quotient | Ein erniedrigtes CD4/CD8-Verhältnis findet man bei Defektimmunopathien, typischerweise beim 'AIDS-related Complex' oder 'full-blown AIDS'. Erhöhte Werte können passager bei Virusinfekten, bei Autoimmunopathien und bei fortgeschrittenen Stadien maligner Tumore auftreten. |
| CD19+ | Alle reifen B-Zellen des peripheren Blutes. Vermehrung bei reaktiven Prozessen und bei B-Zelllymphomen bzw. –leukämien. Verminderung bei Immunschwächeerkrankungen und bei bestimmten Therapieansätzen. |
| CD3-CD16/56+ | Natürliche Killerzellen (NK-Zellen) Eine Vermehrung kann ein Hinweis auf eine Aktivierung der unspezifischen (angeborenen) Immunabwehr sein und wird bei einer Vielzahl sehr unterschiedlicher Erkrankungen gefunden. |
|
CD3+CD16/56+
|
T-Zellen mit Aktivität natürlicher Killerzellen (NKT-Zellen)
|
| CD3+HLA-DR+ CD3+CD25+ |
Aktivierte T-Lymphozyten HLA-DR (MHC II-Antigenexpression) wird auch von B-Lymphozyten exprimiert und hat eine Schlüsselrolle bei der Antigenkennung und Antigenpräsentation. CD25 (IL2-Rezeptor) ist in erster Linie ein Aktivierungsmarker der CD4+T-Zellen, während HLA-DR meist für eine Aktivierung der CD8+ (zytotoxischen) T-Zellen spricht. |
CD20+ B-Zellen
Bei dieser Untersuchung werden T-, B- und NK-Lymphozyten sowie CD20+ B-Zellen bestimmt. Das Parameterspektrum ist zur Überwachung von Therapieansätzen mit CD20-Antikörpern
(z.B. Rituximab) außerhalb der Lymphomtherapie gedacht.
B-Zell-Immunphänotypisierung:
bei Verdacht auf B-Zell-Lymphome / reife B-Zell-Leukämien (B-NHL)
- Suche nach monoklonalen B-Zellen
- Suche nach abnormer Antigenexpression
- Definieren der Antigenexpression von pathologischen B-Zellpopulationen